per مجله دانش و تندرستي در علوم پایه پزشکی 1735-577X 2345-3753 2023-01-08 25 33 10.22100/jkh.v17i4.2959 2425 Zahra Nikoozad 0 https://orcid.org/0000-0002-5736-4353 Taki Tiraihi 0 https://orcid.org/0000-0001-7404-7010 Mahmoud Azami 1 https://orcid.org/0000-0003-4209-0668 Saeid Abroun 2 https://orcid.org/0000-0001-9459-4994 Farideh Feizi 3 https://orcid.org/0000-0003-2454-8399 - گروه علوم تشریح، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران. - گروه مهندسی بافت، دانشکده فناوری‌های نوین، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران. - گروه خون‌شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران. - گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بابل، بابل، ایران. در علم مهندسی بافت، استفاده از سلول­های بنیادی دارای اهمیت ویژه بوده و نقش مهمی در ایجاد بافت­های قابل پیوند دارد. سلول­های بنیادی مشتق شده از بافت چربی (ADSCs) از رایج­ترین سلول­های بنیادی مورد استفاده در درمان بسیاری از بیماری­ها و همچنین در بهبود روند ترمیم زخم­ها در مطالعات پیش بالینی و بالینی هستند. پرده آمنیون انسانی به عنوان یکی از ساختارهای زیستی با ویژگی­های خاص در مهندسی بافت مورد توجه می­باشد. پیپرونیلیک اسید (PA) یک مولکول زیستی کوچک می­باشد که از فلفل سیاه قابل استخراج است. پیپرونیلیک اسید می­تواند مسیرهای انتقال پیام مرتبط با زنده­مانی، رشد و تکثیر سلول­ها را فعال کند. در این مطالعه، سلول‌های بنیادی مشتق از چربی انسانی (hADSCs) بر روی پرده آمنیون سلول­زدایی شده (DHAM)، در حضور پیپرونیلیک اسید به‌عنوان مولکول کوچک در محیط کشت، کشت داده شدند، سپس زنده‌مانی و تکثیر سلول‌ها مورد ارزیابی قرار گرفت. بیان ژن‌های Bax و Bcl2 به عنوان ژن‌های مرتبط با آپوپتوز نیز با روش Real-time PCR مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج رنگ‌آمیزی H&E و PI و همچنین سنجش محتوای DNA، فرآیند سلول‌زدایی پرده آمنیون را تایید کرد. زنده مانی و تکثیر hADSCهای کشت شده بر روی DHAM افزایش معنی داری را در حضور 75 میکرومولار PA نشان دادند. کشت سلولی بر روی DHAM و در حضور 75 میکرومولار PA کاهش معنی‌دار بیان ژن Bax و افزایش بیان ژن Bcl2 را نشان داد. نتایج مطالعه حاضر نشان می­دهد که DHAM به‌عنوان داربست زیستی و همچنین حضور مولکول PA می‌تواند قابلیت زنده‌مانی و پتانسیل تکثیر hADSCs را در شرایط آزمایشگاهی بهبود بخشد. PA به عنوان مولکولی با ویژگی های شبیه به فاکتور رشد می تواند در مهندسی بافت های مختلف و کشت سلولی in vitro استفاده شود. Introduction: Adipose-derived stem cells (ADSCs) are the most common stem cell types used for treating a variety of diseases and also improve wound healing in preclinical and clinical trials. Human amniotic membrane (HAM) is one of the biological substitutes with specific potential to be applied in tissue engineering. Piperonylic acid (PA) is a small molecule extracted from black Piper nigrum that can activate signals associated with cell survival, growth, and proliferation. Methods: To evaluate the viability and proliferation of cells, we decellularized HAM and human adipose-derived stem cells (hADSCs) seeded on DHAM in the presence of piperonylic acid as a small molecule in culture media. Bax and Bcl2 gene expression as apoptosis-related genes was also studied by real-time PCR. Results: HAM decellularization was confirmed through the H&E and PI staining and DNA content assay. The viability and proliferation of hADSCs seeded on DHAM showed a significant increase in the presence of 75 µM PA. Cell cultivation on DHAM demonstrated significantly decreased Bax gene expression and increased Bcl2 gene expression. Conclusion: Based on our findings, DHAM as a bio-scaffold and PA can improve the viability and proliferative potential of hADSCs in vitro. PA with growth factor-like properties can be used in various tissues engineering and in vitro cell cultures. https://knh.shmu.ac.ir/index.php/site/article/view/2959